大肠杆菌是常见的细菌，对于人体是有害的，吉林TOC分析仪，在我们的饮用水中也会存在，要是长时间的饮用含有大肠杆菌的水，对身体会造成一定的伤害。对此，要检查水中的大肠杆菌。本章水质在线监测仪厂家和分享关于饮用水中大肠杆菌检测方法。
具体步骤如下：
1）水样中微生物的收集及其dna的提取： 采用灭菌后的滤膜或滤器过滤水样，在装有无菌水的ep管中，洗涤滤膜，离心， 弃上清液，备用；
2）水样中微生物dna的提取：
a、向ep管中加入te缓冲液，使之重悬；
b、加入sds和蛋白酶k，混匀，温育45min～1h；
c、加入氯仿/异戊醇，混匀，离心，将上清液转入一个新ep管中；
d、加入等体积的酚/氯仿/异戊醇，混匀，离心，将上清液转入一个新ep管中；
e、加入异丙醇，轻轻混合直到dna沉淀下来，离心；
f、弃上清，沉淀物用乙醇洗涤，晾干；
g、将沉淀重溶于te缓冲液，摇匀；
h、用紫外分光光度计测定提取的基因组dna模板的0d值，计算其dna浓度，计算方 法为： dna浓度(μg/μl)=od值260nm×样品稀释倍数×50/1000 i、将基因组dna模板做好标记，贮存，备用；
3）pcr扩增；反应引物：上游引物：5’-tgttcagtggcaagagtt-3’ 下游引物：5’-taatcgatatacccgctc-3’50μl反应体系：10×pcr缓冲液5μl tag酶2u/μl1μl mgcl2(25mm)5μl dntp(2.5mm)5μl ddh2029μl 上游引物10μm2μl 上游引物10μm2μl 模板dna1.5μg/μl1μl
4）产物观察：
a、凝胶的准备：先配置琼脂糖溶液，加热，使其充分溶解，再加入溴化乙锭溶液；
b、配置tae电泳液；
c、倒胶：将配置好的琼脂糖溶液倒入胶板中，待其凝固后，放入电泳槽中；
d、电泳：将扩增好的pcr产物与缓冲液按比例混合，加入到凝胶加样孔中，同时加入 dna分子量标准，接通电源，设定电压和电流，开始电泳。
e、观察；将扩增产物在紫外光下观察，拍摄图片。
本文标题： 饮用水中大肠杆菌检测方法说明 吉林TOC分析仪
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