一般BOD5(五日生化需氧量)常用的是稀释法,将满足上述条件的样品分成两份,一份测定当天的溶解氧质量浓度,另一份放入20摄氏度的培养箱内,培养5天后再检测溶解氧的质量浓度。选择原样品或经适当稀释的样品进行测定,然后用适当的倍数进行稀释。使培养瓶中有足够的溶解氧以满足五日生化的需氧要求。这两种样品的差就是五日生化需氧量。
对于某些污染严重的地面水及大多数工业废水、生活污水,因含较多的有机物,需要稀释后再培养测定,以降低其浓度,保证生物降解过程在有足够溶解氧的条件下进行。其具体水样稀释倍数可借助于高锰酸钾指数或化学需氧量(COD)推算。
对于不含或少含微生物的工业废水,在测定BOD时应进行接种,以引人能分解废水中有机物的微生物。当废水中存在难于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时,应接种经过驯化的微生物。
BOD5的检测步骤
稀释法所用仪器和试剂
(1)恒温生物培养箱,20L细口玻璃瓶,1000mL量筒,玻璃搅棒(棒长应比所用量筒高度长20cm,在棒的底端固定一个直径比量筒直径略小,并带有几个小孔的硬橡胶板),200~300mL溶解氧瓶,虹吸管(供分取水样和添加稀释水用)。
(2)磷酸盐缓冲溶液将8.5g磷酸二氢钾KH2PO4,21.75g磷酸氢二钾K2HPO4,3.4g磷酸氢二钠Na2HPO·7H2O和1.7g氯化铵NH4Cl溶于水中,稀释至1000mL。此溶液的pH为7.2。
(3)硫酸镁溶液将22.5g硫酸镁MgSO4·7H2O溶于水中,稀释至1000mL。
(4)氯化钙溶液将27.5g无水氯化钙溶于水,稀释至1000mL。
(5)氯化铁溶液将0.25g氯化铁FeCl3·6H2O溶于水,稀释至1000mL。
(6)稀释水在20L玻璃瓶内装入一定量的蒸馏水,每升蒸馏水中加入氯化钙溶液、氯化铁溶液、硫酸镁溶液、磷酸盐缓冲溶液各1mL,然后用无油空气压缩机或薄膜泵曝气,使水中溶解氧含量达8~9mg/L时,停止曝气,盖严,使溶解氧稳定。
如果工业废水中含有有毒物质,缺乏微生物时,稀释水中应加适量的经沉淀后的生活污水,作为微生物的接种,通常每升稀释水接种2mL沉淀污水;或将驯化后的特种微生物引入水样中进行接种。
(7)测定溶解氧的全部试剂。
配制BOD5稀释试剂
稀释法检测水中BOD5的操作步骤
1.稀释水的检验
用虹吸法吸取稀释水(或接种稀释水),注满两个溶解氧瓶,加塞,用水封口。其中一瓶立即测定其溶解氧,另一瓶置于恒温生物培养箱内,在(20±1)℃培养5d后测定。要求溶解氧的减少量小于0.2~0.5mg/L。
2.稀释倍数的确定
地面水可由测得的高锰酸盐指数乘以适当的系数求出稀释倍数。